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Une chromatographie liquide-liquide innovante, sans support solide
 La Chromatographie de Partage Centrifuge (CPC) est une méthode de séparation basée sur le partage des solutés entre deux phases liquides. Grâce au champ de force centrifuge généré par la rotation de la colonne (ou rotor) sur elle-même, une phase est maintenue dans le rotor (phase stationnaire) tandis que l'autre, mobile, est pompée au travers. Les solutés migrent à travers le rotor en fonction de leur coefficient de partage Kd :
Procédé de séparation de 3 composés en fonction de leur coefficient de partage :
Pour une meilleure compréhension, le rotor du FCPC® peut être comparé à des ampoules à décanter montées en série.
Les ampoules sont remplies avec la phase stationnaire (dans cet exemple, la plus légère du système biphasique). Dans une première étape, l'échantillon, dissout dans la phase stationnaire, est versé dans la première ampoule à décanter. On rajoute ensuite la phase mobile (la plus lourde), dans un volume équivalent à celui de la phase stationnaire et l'ampoule est agitée. Lors de la décantation, les composés se séparent selon leur affiinité pour l'une ou l'autre des deux phases (selon leur coefficient de partage Kd). Dans un troisième temps, le même volume de phase mobile est ajouté dans la première ampoule à décanter tandis que la phase lourde est retirée et versée dans l'ampoule suivante. Ces étapes sont répétées jusqu'à ce que les 3 composés soient élués.
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En CPC, différents modes peuvent être utilisés. Les deux phases étant liquides, il est possible de choisir leur rôle respectif (stationnaire ou mobile).
Comme dans toute chromatographie, on parle de mode inverse quand la phase stationnaire est plus polaire que la phase mobile et de mode normal dans le cas contraire.
En CPC, il est également possible de travailler en mode descendant (quand la phase mobile est plus lourde que la phase stationnaire) ou ascendant (la phase stationnaire est la plus lourde).
Modes d'élution :
Aux modes gradient et isocratique, un autre mode d'élution spécifique à la CPC peut être utilisé : le Dual Mode. Ce mode consiste à intervertir le rôle des phases au cours d'une même manipulation.
Etape 1 :
a,b,c,d,e sont cinq composés d'un mélange. Leur affinité avec la phase mobile est croissante de a à e. En fonction de leur coefficient de partage, chaque composé migre à sa propre vitesse vers la sortie du rotor.
Etape 2 :
Les composés a et b sont fortement retenus dans la phase inférieure stationnaire. Leur migration est beaucoup moins rapide que les composés c, d et e.
Etape 3 :
La migration des composés a et b prend trop de temps pour traverser tout le rotor.
Comme les deux phases sont liquides, il est possible de les inverser à l'aide d'un système de vanne : la phase stationnaire devient mobile et vice-versa. Les composés sont élués par l'entrée de la colonne.
Mode de déplacement :
1- pH-zone refining
Ce mode est utilisé pour la purification de composés dont la charge électrique dépend de la valeur du pH. Par exemple, un mélange de 3 bases est injecté dans la phase stationnaire inorganique contenant un "reteneur" basique. Les composés basiques migrent le long du rotor via la phase mobile où un "déplaceur" acide a été ajouté. Les composés sont isolés dans les effluents sous forme de sels. L'action conjuguée du "reteneur", du "déplaceur" et du système de solvants favorise la séparation des composés en fonction de leur coefficent de partage et de leur polarité.
2-Ion pairs displacement
Ce mode est basé sur le principe de la paire d'ions : la solubilité d'un composé ionique dépend de la nature du contre-ion, du pH et des solvants.
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